Detección de salmonela
Un sencillo sensor colorimétrico detecta rápidamente la contaminación de los alimentos mediante una sonda de ácido nucleico
Un equipo de investigadores ha desarrollado un ensayo colorimétrico fácil de usar para la detección de alimentos contaminados con salmonela. El ensayo se basa en una nueva sonda de ácido nucleico que se escinde mediante una enzima RNasa específica de la especie de salmonela. Según informa el equipo en la revista Angewandte Chemie, este principio específico de escisión enzimática permitió construir un sistema de ensayo sensible, pero sencillo y portátil, utilizando oro coloidal.
© Wiley-VCH
El consumo de alimentos contaminados con Salmonella typhimurium, ya sean huevos, carne picada o pollo, puede provocar una intoxicación alimentaria grave. Sin embargo, los casos sospechosos de salmonelosis no suelen confirmarse hasta varios días después, cuando la bacteria se detecta en los laboratorios de microbiología mediante su cultivo. Un equipo de investigadores dirigido por Yingfu Li, Tohid Didar y Carlos Filipe, de la Universidad McMaster de Hamilton (Canadá), ha desarrollado ahora un novedoso sistema de pruebas basado en una sonda híbrida de ADN-ARN que detecta específica y rápidamente la salmonela, sin necesidad de diagnósticos microbiológicos ni costosos equipos analíticos.
Mediante un proceso de selección de varias rondas, el equipo de McMaster descubrió una sonda híbrida artificial de ADN-ARN que es sustrato de una forma de enzima RNasa H específica de la salmonela. Basándose en este reconocimiento enzimático altamente específico, el equipo desarrolló primero un ensayo basado en la fluorescencia de la RNasa H de la salmonela, y luego amplió el principio a un ensayo sencillo y portátil de la salmonela basado en una colorimetría de oro coloidal.
El oro coloidal es un reactivo de color común que muchos de nosotros conocemos por su uso en las tiras reactivas del antígeno SARS-CoV-2. Sin embargo, apartándose ligeramente de esta metodología, el equipo no utilizó una tira de papel como base de su ensayo, sino que recurrió a puntas de pipeta de plástico, que se utilizan habitualmente en el laboratorio para medir cantidades específicas de líquidos.
Para preparar el ensayo colorimétrico, primero se recubrió la pared interior de una punta de pipeta con nanogold funcionalizado con ADN. A continuación, se aspiró en la punta de la pipeta una mezcla de reactivos compuesta por nanogold-ADN y la sonda ADN-ARN, lo que provocó la formación de una doble capa de nanogold en las paredes, ya que la sonda híbrida ADN-ARN une ambas capas.
Sin embargo, cuando la mezcla de la muestra contiene salmonela, la capa superior se desprende gracias a que la RNasa H de la salmonela escinde específicamente la sonda de enlace ADN-ARN. Cuando la solución que contiene oro se escurre sobre una almohadilla absorbente con una membrana de nailon, una mancha roja clara indica la presencia de salmonela en la muestra analizada. El equipo también comprobó la especificidad de su sistema y descubrió que no detectaba falsamente la presencia de otras bacterias que contuvieran ARNasa H.
Los autores destacan que la prueba no sólo es mucho menos compleja que otros métodos de detección de la salmonela, sino también mucho más rápida. A diferencia de otros métodos, sólo se requiere una hora de incubación en una punta de pipeta para una detección altamente sensible de salmonela, por ejemplo, en carne picada de vacuno. En el futuro, el equipo prevé desarrollar más sondas de ácido nucleico que puedan detectar específicamente otros patógenos infecciosos, por ejemplo bacterias coliformes como E. coli.
Nota: Este artículo ha sido traducido utilizando un sistema informático sin intervención humana. LUMITOS ofrece estas traducciones automáticas para presentar una gama más amplia de noticias de actualidad. Como este artículo ha sido traducido con traducción automática, es posible que contenga errores de vocabulario, sintaxis o gramática. El artículo original en Inglés se puede encontrar aquí.
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