Detección del dopaje del gen CRISPR/Cas
Un paso inicial hacia una prueba para identificar a los atletas que tratan de obtener una ventaja injusta
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El método de edición genética llamado CRISPR/Cas es una forma popular para que los científicos cambien precisamente el ADN en muchos organismos, y recientemente ganó aún más atención cuando los principales desarrolladores del método fueron galardonados con el Premio Nobel de Química 2020. Con este método, los investigadores añaden una molécula de ARN y una proteína en las células. La molécula de ARN guía a la proteína a la secuencia apropiada de ADN, y luego la proteína corta el ADN, como un par de tijeras, para permitir las alteraciones. A pesar de las preocupaciones éticas que se han planteado sobre la posible aplicación del método en los seres humanos, algunos atletas podrían ignorar los riesgos y utilizarlo mal para alterar sus genes. Debido a que CRISPR/Cas cambia el ADN, se considera "dopaje genético" y está prohibido por la Agencia Mundial Antidopaje, una organización internacional independiente. Sin embargo, es necesario desarrollar un método suficiente para detectar la edición de genes de CRISPR/Cas. Por lo tanto, Mario Thevis y sus colegas querían ver si podían identificar la proteína con mayor probabilidad de ser utilizada en este tipo de dopaje, Cas9 de la bacteria Streptococcus pyogenes (SpCas9), en muestras de plasma humano y en modelos de ratones.
El equipo introdujo la proteína SpCas9 en el plasma humano, y luego aisló la proteína y la cortó en trozos. Cuando los trozos fueron analizados por espectrometría de masas, los investigadores descubrieron que podían identificar con éxito los componentes únicos de la proteína SpCas9 de la compleja matriz plasmática. En otro experimento, la SpCas9 inactivada, que puede regular la expresión de los genes sin alterar el ADN, fue introducida en muestras de plasma humano. Con una ligera modificación, el método permitió al equipo purificar y detectar la forma inactiva. Finalmente, el equipo inyectó SpCas9 en ratones y demostró que sus concentraciones alcanzaban su punto máximo en la sangre circulante después de 2 horas y podían detectarse hasta 8 horas después de su administración en el tejido muscular. Los investigadores dicen que aunque todavía queda mucho trabajo por hacer, este es un paso inicial hacia una prueba para identificar a los atletas que tratan de obtener una ventaja injusta.
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