El resplandor revela bacterias peligrosas
Sondas de quimioluminiscencia para la detección rápida y sensible de salmonela y listeria
La salmonela y la listeria se encuentran entre las causas más extendidas y mortales de las infecciones transmitidas por los alimentos. Su detección rápida y fiable en equipos de procesamiento de alimentos e industriales es muy importante. En la revista Angewandte Chemie, los científicos han introducido un nuevo método ultrasensible basado en la quimioluminiscencia para la detección directa de Salmonella y Listeria monocytogenes. Debido a su simplicidad y sensibilidad, esta prueba es significativamente más rápida que los métodos convencionales y puede llevarse a cabo en el campo.
© Wiley-VCH
Se estima que alrededor de un millón de personas al año se infectan con infecciones de salmonela sólo en los Estados Unidos. De éstos, 380 mueren. Las infecciones por listeria también pueden ser fatales. Los métodos de ensayo actuales suelen requerir el crecimiento de cultivos bacterianos en un laboratorio de contención. Un resultado concluyente basado en técnicas de diagnóstico estándar generalmente toma de dos a seis días.
Investigadores que trabajan con Urs Spitz y Doron Shabat en la Universidad de Tel Aviv, Nemis Technologies AG (Zurich, Suiza), la Universidad de Ciencias Aplicadas de Zurich y Biosynth AG (Staad, Suiza) han introducido ahora un método nuevo y eficaz para la detección ultrasensible y significativamente más rápida de Salmonella y Listeria. El método se basa en la quimioluminiscencia, la emisión de luz resultante de un proceso químico. La simplicidad de las pruebas permite tanto el enriquecimiento de las bacterias como su detección en un tubo de ensayo, sin más preparación de la muestra, por lo que no es necesario un laboratorio de contención. Las sondas de quimioluminiscencia han demostrado ser unas 600 veces más sensibles que las sondas de fluorescencia convencionales.
El éxito de esta técnica se debe a dos moléculas de sonda especialmente desarrolladas que se fabrican combinando una sustancia luminiscente (un fenoxi-dioxetano) con un "disparador". En esta forma la sonda no se enciende. El desencadenante se adapta a las bacterias a detectar: es reconocido por una enzima específica producida por el patógeno -una esterasa especial en el caso de la Salmonella y una fosfolipasa C especial para la Listeria- que la separa de la parte luminiscente. Esto inicia una reacción química que hace que la molécula luminiscente separe más piezas. La energía liberada por la reacción se emite en forma de un brillo verde muy intenso. Pruebas con varias bacterias demostraron que la sonda adaptada a la prueba de Listeria sólo reacciona a Listeria monocytogenes, no a otras cepas de listeria no patógenas. La intensidad del resplandor se puede utilizar para cuantificar la concentración de bacterias. Las pruebas son tan sensibles que, por ejemplo, se puede detectar un recuento de diez salmonelas en las seis horas siguientes al enriquecimiento. Incluso las bacterias secas pueden ser limpiadas de las superficies y detectadas.
Los investigadores están seguros de que su nuevo método se puede utilizar más ampliamente para desarrollar sondas de quimioluminiscencia específicas para otras bacterias.
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