Génétique précise : une nouvelle méthode CRISPR permet de modifier efficacement l'ADN
Deux méthodes combinées
Le groupe de recherche dirigé par le professeur Markus Affolter au Biozentrum de l'Université de Bâle a mis au point une nouvelle méthode qui améliore encore les technologies CRISPR/Cas existantes : elle permet d'introduire de manière plus précise et plus transparente des étiquettes dans les protéines au niveau des gènes. Cette technologie pourrait améliorer considérablement la recherche sur les protéines dans les organismes vivants et ouvrir de nouvelles possibilités pour la recherche médicale.
La technologie révolutionnaire CRISPR/Cas permet de modifier avec précision l'ADN des organismes vivants. À l'aide d'un ARN guide qui reconnaît une séquence d'ADN spécifique, la protéine Cas9 est recrutée sur cette séquence et coupe l'ADN. Cette coupure ciblée permet de réparer ou de modifier l'ADN à cet endroit précis.
L'équipe du professeur Markus Affolter au Biozentrum de l'université de Bâle a mis au point une nouvelle méthode appelée SEED/Harvest chez la mouche des fruits(Drosophila melanogaster). Cette méthode combine la technique CRISPR-Cas9 avec la voie de réparation Single-Strand Annealing (SSA), ce qui permet d'effectuer des modifications à l'échelle du génome de manière plus efficace et sans laisser de cicatrices indésirables. L'étude a été publiée dans la revue Developmental Cell.
Deux méthodes combinées
La méthode SEED/Harvest se déroule en deux étapes. Dans un premier temps, les chercheurs ont introduit un gène marqueur dans le site ADN souhaité au sein d'une région codant pour des protéines. Ce marqueur est placé à l'endroit ciblé et est utilisé pour isoler les modifications réussies.
Dans une deuxième étape, le marqueur est excisé et les points de rupture de l'ADN sont réparés par la voie de réparation du recuit simple brin (SSA). "Cela nous permet de couper l'ADN sans couture tout en conservant sa fonction complète", explique Gustavo Aguilar, premier auteur de l'étude. "La combinaison des deux méthodes permet de marquer n'importe quelle protéine souhaitée dans le génome sans dommage collatéral, ce qui nous permet d'étudier les fonctions des protéines dans les organismes vivants.
Plus précis et plus efficace
"Comme nous souhaitons introduire et analyser des modifications de l'ADN dans l'ensemble du génome pour nos recherches, la méthode doit être à la fois précise et efficace", explique M. Affolter. "La méthode SEED/Harvest est à la fois précise et efficace. Elle combine le criblage le plus robuste d'insertions réussies et tous les avantages d'un marquage transparent."
De nouvelles opportunités de recherche
L'un des avantages de la méthode SEED/Harvest est que les protéines peuvent être marquées dans des tissus et des types de cellules spécifiques. "Nous pouvons désormais contrôler et déterminer dans différents tissus et stades de développement quand et où les gènes sont activés ou inactivés", ajoute Gustavo Aguilar. Cela ouvre de nouvelles possibilités de recherche pour étudier systématiquement la dynamique des protéines dans les cellules vivantes en temps réel.
Cette méthode n'est pas seulement importante pour la génétique et la biotechnologie. "La méthode SEED/Harvest pourrait également présenter un intérêt pour la recherche médicale, par exemple pour identifier les défauts causés par des gènes pathologiques", explique M. Affolter.
Note: Cet article a été traduit à l'aide d'un système informatique sans intervention humaine. LUMITOS propose ces traductions automatiques pour présenter un plus large éventail d'actualités. Comme cet article a été traduit avec traduction automatique, il est possible qu'il contienne des erreurs de vocabulaire, de syntaxe ou de grammaire. L'article original dans Anglais peut être trouvé ici.
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