TSKgel FCR-IIIA columns

Las columnas TSKgel FcR-IIIA simplifican los estudios de afinidad del receptor Fc de anticuerpos

Las columnas TSKgel FcR-IIIA se basan en un receptor Fc gamma IIIa recombinante que se inmoviliza como ligando en partículas de polímero. Separan anticuerpos monoclonales según su afinidad al receptor y permiten un análisis rápido de la actividad biológica así como el fraccionamiento junto con la actividad biológica.

La cromatografía de afinidad basada en el receptor Fc gamma IIIa se correlaciona con la glicosilación y la ADCC

El receptor Fc gamma IIIa desempeña un papel clave en la citotoxicidad mediada por células dependientes de anticuerpos (ADCC), que es un mecanismo de acción crucial de los mAbs antitumorales. Se sabe que los glicanos Fc de los anticuerpos desempeñan un papel importante en las funciones efectoras mediadas por Fc. Por lo tanto, los patrones de separación de anticuerpos terapéuticos en TSKgel FcR-IIIA pueden correlacionarse con los N-glicanos Fc y la actividad ADCC de las inmunoglobulinas. Los picos de elución temprana de las columnas de TSKgel FcR-IIIA representan glicoformas con baja actividad ADCC, mientras que los picos de elución tardía representan glicoformas con alta actividad ADCC.

TSKgel FcR-IIIA-NPR para el análisis rápido de la afinidad del receptor Fc

Una separación rápida de treinta minutos permite el análisis de un gran número de muestras de mAb para obtener una primera información valiosa sobre la distribución de las glicoformas y la actividad ADCC esperada. Este método rápido y eficaz puede aplicarse tanto a muestras purificadas como al sobrenadante y, por lo tanto, puede utilizarse en muchas fases del desarrollo y la producción, como el cribado de líneas celulares en las primeras fases de I+D, la comparación de biosimilares/originadores, el desarrollo y la optimización de fases previas, la supervisión de la glicoingeniería o la comparación lote a lote en el control de calidad.

TSKgel FcR-IIIA-5PW para la recogida de anticuerpos con diferentes afinidades del receptor Fc

La columna semipreparativa puede cargarse con suficiente material para obtener fracciones que contengan suficiente proteína para su uso en análisis posteriores. Las fracciones resultantes son anticuerpos con diferentes afinidades al receptor Fc y pueden caracterizarse, por ejemplo, en cuanto a su estado de glicosilación, actividad ADCC o propiedades cinéticas de unión. Esto ayuda a comprender la base de la afinidad del receptor Fc, la estructura y la función del anticuerpo. Además, los datos generados con fracciones de la columna FcR-IIIA-5PW apuntalan los datos obtenidos con la columna FcR-IIIA-NPR y validan las correlaciones con la glicosilación o la ADCC.