Affinitätschromatographiesäulen:
TSKgel FCR-IIIA columns
Schnelle und genaue Affinitätsanalyse von Antikörpern mit FcR-Chromatographie
TSKgel FcR-IIIA Säulen vereinfachen Fc-Rezeptor-Affinitätsstudien von Antikörpern
TSKgel FcR-IIIA Säulen basieren auf einem rekombinanten Fc gamma IIIa Rezeptor, der als Ligand auf Polymerpartikeln immobilisiert ist. Sie trennen monoklonale Antikörper entsprechend ihrer Affinität zum Rezeptor und ermöglichen eine schnelle Analyse der biologischen Aktivität sowie eine Fraktionierung zusammen mit der biologischen Aktivität.
Affinitätschromatographie auf der Grundlage des Fc gamma IIIa-Rezeptors korreliert mit Glykosylierung und ADCC
Der Fc-gamma-IIIa-Rezeptor spielt eine Schlüsselrolle bei der antikörperabhängigen zellvermittelten Zytotoxizität (ADCC), die ein entscheidender Wirkmechanismus von Anti-Tumor-MAbs ist. Es ist bekannt, dass die Fc-Glykane von Antikörpern eine wichtige Rolle bei den Fc-vermittelten Effektor-Funktionen spielen. Daher können die Trennungsmuster von therapeutischen Antikörpern auf TSKgel FcR-IIIA mit den Fc-N-Glykanen und der ADCC-Aktivität von Immunglobulinen korreliert werden. Die früh eluierenden Peaks der TSKgel FcR-IIIA Säulen repräsentieren Glykoformen mit geringer ADCC-Aktivität, während die spät eluierenden Peaks Glykoformen mit hoher ADCC-Aktivität darstellen.
TSKgel FcR-IIIA-NPR für die schnelle Fc-Rezeptor-Affinitätsanalyse
Eine schnelle dreißigminütige Trennung ermöglicht die Analyse einer großen Anzahl von mAb-Proben, um wertvolle erste Informationen über die Verteilung der Glykoformen und die erwartete ADCC-Aktivität zu erhalten. Diese schnelle und effiziente Methode kann sowohl auf gereinigte Proben als auch auf den Überstand angewendet werden und kann daher in vielen Phasen der Entwicklung und Produktion eingesetzt werden, z. B. beim Zelllinien-Screening in der frühen F&E, beim Vergleich von Biosimilars/Originatoren, bei der Upstream-Entwicklung und -Optimierung, bei der Überwachung des Glyco-Engineerings oder beim Lot-to-Lot-Vergleich in der Qualitätskontrolle.
TSKgel FcR-IIIA-5PW für die Sammlung von Antikörpern mit unterschiedlichen Fc-Rezeptor-Affinitäten
Die semipräparative Säule kann mit ausreichend Material beladen werden, um Fraktionen zu erhalten, die genügend Protein für weitere Analysen enthalten. Bei den resultierenden Fraktionen handelt es sich um Antikörper mit unterschiedlichen Fc-Rezeptor-Affinitäten, die z. B. hinsichtlich ihres Glykosylierungsstatus, ihrer ADCC-Aktivität oder ihrer kinetischen Bindungseigenschaften charakterisiert werden können. Dies hilft, die Grundlagen der Fc-Rezeptor-Affinität, Antikörperstruktur und -funktion zu verstehen. Darüber hinaus untermauern die mit den Fraktionen der FcR-IIIA-5PW-Säule gewonnenen Daten die mit der FcR-IIIA-NPR-Säule gewonnenen Daten und bestätigen die Korrelationen zur Glykosylierung oder ADCC.
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