TSKgel FCR-IIIA columns

As colunas TSKgel FcR-IIIA simplificam os estudos de afinidade de anticorpos ao recetor Fc

As colunas TSKgel FcR-IIIA baseiam-se num recetor Fc gama IIIa recombinante imobilizado como ligando em partículas de polímero. Separam os anticorpos monoclonais de acordo com a sua afinidade com o recetor e permitem uma análise rápida da atividade biológica, bem como o fracionamento em conjunto com a atividade biológica.

A cromatografia de afinidade baseada no recetor Fc gama IIIa está correlacionada com a glicosilação e a ADCC

O recetor Fc gama IIIa desempenha um papel fundamental na citotoxicidade mediada por células dependente de anticorpos (ADCC), que é um mecanismo crítico de ação dos mAbs anti-tumorais. Sabe-se que os glicanos Fc dos anticorpos desempenham um papel importante nas funções efectoras mediadas por Fc. Por conseguinte, os padrões de separação dos anticorpos terapêuticos no TSKgel FcR-IIIA podem ser correlacionados com os Fc-N-glicanos e a atividade ADCC das imunoglobulinas. Os picos de eluição precoce das colunas TSKgel FcR-IIIA representam glicofórmulas com baixa atividade ADCC, enquanto os picos de eluição tardia representam glicofórmulas com elevada atividade ADCC.

TSKgel FcR-IIIA-NPR para uma análise rápida da afinidade do recetor Fc

Uma separação rápida de trinta minutos permite a análise de um grande número de amostras de mAb para fornecer informações iniciais valiosas sobre a distribuição das glicoformas e a atividade ADCC esperada. Este método rápido e eficiente pode ser aplicado tanto a amostras purificadas como ao sobrenadante e pode, por isso, ser utilizado em muitas fases de desenvolvimento e produção, por exemplo, no rastreio de linhas celulares no início da I&D, na comparação de biossimilares/originários, no desenvolvimento e otimização a montante, na monitorização da glico-engenharia ou na comparação entre lotes no controlo de qualidade.

TSKgel FcR-IIIA-5PW para a recolha de anticorpos com diferentes afinidades de receptores Fc

A coluna semi-preparativa pode ser carregada com material suficiente para obter fracções que contenham proteínas suficientes para análises posteriores. As fracções resultantes são anticorpos com diferentes afinidades de receptores Fc, que podem ser caracterizados, por exemplo, em relação ao seu estado de glicosilação, atividade ADCC ou propriedades cinéticas de ligação. Isto ajuda a compreender os princípios básicos da afinidade do recetor Fc, da estrutura e da função dos anticorpos. Além disso, os dados obtidos com as fracções da coluna FcR-IIIA-5PW corroboram os dados obtidos com a coluna FcR-IIIA-NPR e confirmam as correlações com a glicosilação ou ADCC.