Detección directa de células tumorales circulantes en muestras de sangre

Aumento de la intensidad luminosa

09.08.2019 - China

Las células tumorales que circulan en la sangre sirven como marcadores para la detección temprana y el pronóstico de enfermedades cancerosas. Sin embargo, su detección es difícil debido a su pequeña cantidad. En la revista Angewandte Chemie, los científicos presentan un enfoque ultrasensible para la detección directa de células tumorales circulantes en muestras de sangre. Se basa en una medición de fluorescencia mejorada y resuelta en el tiempo de los iones de lantánidos luminosos liberados por las nanopartículas que se unen específicamente a las células tumorales.

© Wiley-VCH

Las técnicas convencionales para la detección de células tumorales circulantes requieren un enriquecimiento complejo antes de la detección, ya que sólo hay una célula tumoral por cada 10 millones de células sanguíneas. El nuevo enfoque del equipo dirigido por Xiaorong Song, Xueyuan Chen y Zhuo Chen del Instituto Fujian de Investigación sobre la Estructura de la Materia, la Academia China de Ciencias, la Universidad Agrícola y Forestal de Fujian y el Hospital Fujian de Cáncer (Fuzhou, Fujian, China), por otra parte, no tiene ningún paso de enriquecimiento y detecta las células tumorales circulantes muy sensiblemente directamente en las muestras de sangre. Se basa en un método llamado "fotoluminiscencia con resolución mejorada y resolución en el tiempo" y utiliza nanopartículas fluorescentes de un compuesto complejo del lantánido europio como componente clave.

Inicialmente, los investigadores produjeron anticuerpos contra la molécula de adhesión celular epitelial (EpCAM), una glicoproteína que se encuentra en gran número en la superficie de muchas células tumorales y que se considera un marcador de diagnóstico para el cáncer. Los pocillos de las placas de microtitulación fueron recubiertos con los anticuerpos para que las células tumorales contenidas en una muestra de sangre permanezcan firmemente en los pocillos mientras se extraen otros componentes sanguíneos.

Los científicos recubrieron las nanopartículas que contienen Europio con los mismos anticuerpos, que luego se colocan en solución en los pocillos y se unen en grandes cantidades específicamente a las células tumorales. Un "desarrollador" añadido posteriormente disuelve las nanopartículas y libera miríadas de iones de europio. Los componentes de la solución de revelado los unen inmediatamente y los encierran con firmeza. Esto aumenta su fluorescencia muchas veces.

Otra ventaja esencial del método: los iones de Europio son fluoróforos de muy larga duración y presentan fluorescencia durante varios microsegundos después de ser excitados por un destello de luz. Dado que la medición es temporizada, la medición puede iniciarse con un retardo de tiempo. Las señales de fondo debidas a la autofluorescencia de los componentes celulares, por otro lado, duran sólo unos pocos nanosegundos y luego ya se han descompuesto. La sensibilidad de las mediciones aumenta. Los investigadores ya han logrado detectar una sola célula tumoral por pocillo de placa de microtitulación.

Las pruebas con muestras de sangre de pacientes con cáncer ya registraron 10 células por mililitro de sangre. 14 de cada 15 pacientes tumorales pudieron ser identificados con el nuevo método. El número de células tumorales se correlacionó fuertemente con la etapa del cáncer en los pacientes.

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