miniDAWN

Der miniDAWN^® Multi-Angle Light Scattering (MALS) Detektor

Das miniDAWN ist die neueste Generation des 3-Winkel-Streulichtdetektors von Wyatt Technology. Die Messung von absoluten Molmassen und Radien gekoppelt an die Chromatographie (GPC / SEC / HPLC) wird mit dem miniDAWN noch sensitiver und einfacher. Auch neue Anwender kommen in wenigen Schritten zum perfekten Messergebnis: Das miniDAWN lässt sich problemlos in vorhandenen HPLC-Systemen als weiterer Detektor einbinden und die Messung und Auswertung wird mit einem einzigen Klick in der Software gestartet.

Mit MALS (Mehrwinkellichtstreuung, Multi Angle Light Scattering), oft auch als klassische oder statische Lichtstreuung (SLS) bezeichnet, wird das Molekulargewicht von Makromolekülen aufgrund der Menge ihres Streulichtes gemessen. Die Besonderheit an der MALS-Lösung von Wyatt Technology: Man kann mit ihr absolute Messungen durchführen, d.h. ohne Standards zu verwenden oder Annahmen über die Eigenschaften der Moleküle machen zu müssen.

Die Sensitivität des miniDAWN Streulichtdetektors setzt industrieweit Standards, was die Genauigkeit und Reproduzierbarkeit weiter verbessert. Es genügen 25 ng (!) Substanz, um die Molmasse eines 100 kDa Moleküls zu bestimmen.

Mit dem miniDAWN geht Wyatt Technology einen völlig neuen Weg durch modulare Konstruktion des Detektors. Mit der neuesten Gerätegeneration haben wir neben den über Jahrzehnte stetig verbesserten technischen Eigenschaften besonders die Benutzerfreundlichkeit sowie die Wartbarkeit direkt vor Ort in den Fokus gestellt. Die Smart Services^TM Platform kombiniert diverse Funktionen, die eine reibungslose Anwendung sowie schnellen Service im Falle von Reparaturen garantieren. Der „System Ready Monitor“ des 7-Zoll-Touchdisplays zeigt farbcodiert, wenn das System messbereit ist. Über den „Real-Time Instrument Health Indicator“ können mit einem Tippen detailliertere Informationen abgerufen werden, die z.B. einen Signal-Drift durch unzureichende Säulenequilibration identifizien. Mit CheckPlus^TM kann ein kompletter Systemreport auf Wunsch automatisiert generiert werden, der zum Wyatt-Support geschickt wird. Wesentliche Komponenten wie die optische Bank oder das Display können leicht vor Ort ausgewechselt werden, so dass keine Ausfallzeit entsteht. Damit bietet das miniDAWN eine außergewöhnliche Investitions- und Zukunftssicherheit.

miniDAWN: Die Spezifikationen

• Absolute Molmassen von 200 Da bis 10 MDa
• Sensitivität: 25 ng eines Polymers von 100 kDa in THF
• Laserleistung regelbar von 10-100 %
• Online-DLS-Option verfügbar
• COMET Ultraschall Zellreinigung

Integration in HPLC Systeme:
Der miniDAWN Streulichtdetektor lässt sich problemlos in alle chromatographischen Systeme integrieren. Wyatt Technology führt im Rahmen der Geräteinstallation die entsprechenden Anpassungen durch.

Wyatt Technology Komplettsystem SEC/GPC
Wyatt Technology bietet für die makromolekulare Charakterisierung optimierte Komplettsysteme, GPC-Systeme beziehungsweise SEC-Systeme, an. Sie sind je nach Anwendung für wässrige und / oder organische Laufmittel konfiguriert. Natürlich kann neben MALS auch eine DLS-, Vis-, DRI-, UV-, DAD- und Fl-Detektion gekoppelt werden. Die Anbindung von Fraktionssammlern ist ebenfalls möglich. Für spezielle Anwendungen sind außerdem biokompatible oder metallfreie Anlagen verfügbar.

Komplettsysteme mit FFF
Der miniDAWN Streulichtdetektor kann als Detektor auch an die Feldflussfraktionierung (FFF) gekoppelt werden. Die Feldflussfraktionierung ist ein schonendes und leistungsfähiges Verfahren für die Trennung von Makromolekülen und Partikeln. Die Trennung erfolgt im Fluss ohne stationäre Phase. Wyatt Technology bietet mit Eclipse^® AF4 und Eclipse® DUALTEC leistungsstarke Systeme für die Asymmetrische Feldflussfraktionierung (AF4), Frit-Inlet-Feldflussfraktionierung (FI-FFF) und Hohlfaser-Feldflussfraktionierung (HF5) an.

Inline Zellreinigung
Wyatt Technology hat das Zellreinigungssystem COMET für den miniDAWN Streulichtdetektor entwickelt. COMET ist ein Reinigungsgerät, das die Flusszelle mittels Ultraschalltechnik reinigt. Es ist in das miniDAWN integriert, und die Reinigung lässt sich per Software aktivieren. Durch die automatisierte Säuberung der Messzelle erhöht sich die Produktivität des Systems.

Kombination mit DLS
MALS ermöglicht durch die simultane Messung des Streulichtes bei verschiedenen Winkeln die Bestimmung der Molekülgröße in Form des Gyrationsradius. Optional kann ein DLS (Dynamische Lichtstreuung) Detektor in den miniDAWN Streulichtdetektor integriert werden. Durch die Kombination beider Messmethoden, MALS und DLS, lassen sich Gyrationsradius und Hydrodynamischer Radius simultan bestimmen. Das Verhältnis dieser zwei Größen ermöglicht Aussagen über die Gestalt der gemessenen Moleküle und Partikel. Bei der Kopplung von MALS mit DLS wird nur eine Flusszelle eingesetzt, da es sich um eine integrierte Lösung handelt. Dies reduziert die sekundäre Bandenverbreiterung und vermindert den Gegendruck im Messsystem.

Protein-Konjugat-Analyse
Durch die Kombination von MALS mit RI und UV erhält man bei der Analyse von Protein-Konjugaten die Molmasse des Komplexes und zusätzlich die Molmasse des Proteins und der zweiten Komponente des Komplexes. Dadurch lässt sich die Zusammensetzung und die Molmasse der Komponenten des Komplexes bestimmen. Dabei kann es sich bei der zweiten Komponente um ein zweites Protein, Polysaccharid, PEG oder eine andere Verbindung handeln. Diese Art der Analyse wird auch bei Membranproteinen angewendet. Als Ergebnis werden hierbei die Molmasse des Membranproteins und die Molmasse der Mizelle bestimmt.

Kombination mit online Viskositätsmessung
Die Kombination aus online Viskositätsmessung (Vis) und MALS ermöglicht eine umfassende Charakterisierung von Polymeren. Neben den absolut gemessenen Molmassen sind die spezifische Viskosität und der Molekülradius (R_g) sowie der hydrodynamische Radius R_h verfügbar. Dies ermöglicht die Bestimmung der molekularen Gestalt aus einer Messung mithilfe des Kuhn-Mark-Houwink-Sakurada-Plots. Zudem kann man – in Kenntnis der Gyrationsradien sowie der Viskosität – Verzweigungsanalysen durch Anwendung der Zimm-Stockmeyer-Theorie durchführen.

Batch-Messungen
Neben der Kopplung an die Chromatographie kann der miniDAWN Streulichtdetektor auch als „Stand Alone“-Gerät im Batch-Modus eingesetzt werden. Dabei sind neben der Molmasse und dem Radius auch der zweite Virialkoeffizient (A₂) messbar. Der A₂ ist ein Maß für die Löslichkeit von Substanzen und findet Anwendung im Bereich Proteinkristallisation und Proteinformulierung.

ASTRA Software
Die Detektoren von Wyatt Technology sind mit der ASTRA^® Software erhältlich. ASTRA stellt alle Funktionen für die Charakterisierung von Polymeren und Proteinen zur Verfügung und unterstützt Batch-Messungen ebenso wie chromatographische Messungen mit SEC / GPC / FFF, Mehrwinkel-Lichtstreuung (MALS), Dynamische Lichtstreuung (DLS), Konzentrationsbestimmung (RI & UV) und Viskositätsmessung (Vis).

ASTRA überzeugt mit umfangreicher Funktionalität und einer komfortablen Benutzeroberfläche, die effizientes Arbeiten ermöglicht. Ein Schwerpunkt ist die Automatisierung der Arbeitsabläufe. Ein Assistent führt durch die Erstellung von neuen Methoden, die sich mit wenigen Mausklicks konzipieren lassen.

Basislinien und Auswertebereiche sind automatisch bestimmbar. Mit dem leistungsfähigen WYSIWYG („what you see is what you get“) Report Editor kann der Anwender per Maus alle Informationen komfortabel ein- oder ausblenden.

ASTRA erlaubt auf einfache Weise den Vergleich verschiedener Messungen und Proben. So lassen sich die Ergebnisse grafisch in EASI Graph und numerisch in EASI Table gegenüber stellen.

Zusätzliche Funktionen wie die Bestimmung der statistischen Präzision der Messungen, Korrektur der sekundären Bandenverbreiterung, Berechnung der Anzahl der theoretischen Böden sowie für die Darstellung der differentiellen und kumulativen Molekulargewichtsverteilungen stehen bereit. Außerdem erlaubt ASTRA die detaillierte Analyse von Copolymeren, Verzweigungen und Proteinkomplexen.

miniDAWN Protein-Anwendungen

• Charakterisierung von Peptiden, Proteinen und Aggregaten
• Proteinkristallisation, Proteinformulierung, Qualitätskontrolle
• PEGylierte und glycosylierte Proteine, Protein-Komplexe
• Membranproteine

Mehr Informationen zum miniDAWN sowie zu den Themen Statische und Dynamische Lichtstreuung sowie Feldflussfraktionierung gibt es auf der Produktwebsite.