Serielle Analyse der Genexpression

Vorlage:DISPLAYTITLE:serielle Analyse der Genexpression Die serielle Analyse der Genexpression (SAGE, v. engl. Serial Analysis of Gene Expression) ist eine effektive Methode zur Identifizierung von kurzen cDNA-Fragmenten, sogenannten "Tags", die mittels dem Enzym Reverse Transkriptase aus mRNA-Molekülen gewonnen wurden.

Weiteres empfehlenswertes Fachwissen

Wie kann man Pipetten schnell überprüfen?

Empfindlichkeitsprüfung von Laborwaagen

Leitfaden zu den grundlegenden Laborkenntnissen

Während die ursprüngliche SAGE Methode lediglich Tags von 10-14 bp Nukleotiden hervorbrachte, entstehen bei der aktuellsten Variante SuperSAGE, Tags von 25-27- bp Länge. Dies ermöglicht eine vielfach bessere Zuordnung zu bekannten Gensequenzen, erlaubt das Design von spezifischen Primern z.B. für RACE-PCR und eröffnet neue Analyse-Möglichkeiten, z.B. die gleichzeitige Analyse mehrerer Organsimen. Aufgrund der längeren Tags empfiehlt sich SuperSAGE auch zur Analyse von Organismen mit unbekannten Genomen und zur Entdeckung neuer Gene und Transkript-Varianten.

Mit SAGE und seinen Varianten kann das Transkriptom einer Zelle, eines Gewebes oder eines Organs zu einem beliebigen Entwicklungs- oder Krankheitsstadium umfassend analysiert werden.

SAGE und seine Varianten ermöglichen die Analyse einer sehr großen Menge von Genen. Ferner kann die Anzahl der genspezifischen mRNA-Moleküle relativ gut bestimmt werden; SAGE ist also eine quantifizierende Methode. Gegenüber dem Microarray-Verfahren, welches als "Closed System" nur bekannte und gespottete Gene detektieren kann, bietet SAGE als "Open System" den Vorteil, dass auch noch unbekannte Gene, oder Gene, von denen nicht erwartet wurde, sie vorzufinden, detektiert und ausgewertet werden können.

SAGE wurde 1995 von Velclescu et al. vorgestellt, SuperSAGE 2003 von Matsumura et al.